亚洲日韩精彩无码久久久_2020㊣最新国产の精品_日韩毛片一级中文字幕_性老熟妇免费AV_欧美视频在线亚色_男人天堂·手机版在线_中国无码精品在线_国产探花色视频_欧美五级黄门外站_亚洲爱福利视频网

一、糖發(fā)酵管

成分：

PH = 7.4

制法：

1. 葡萄糖發(fā)酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分裝于有一個倒置小管的小試管內，121℃高壓滅菌15min。

2. 其他各種糖發(fā)酵管可按上述成分配好后，分裝每瓶1000 mL，121℃高壓滅菌15min。另將各種糖類分別配好10%溶液，同時高壓滅菌。將5mL糖溶液加入于100 mL培養(yǎng)基內，以無菌操作分裝小試管。

注：蔗糖不純，加熱后會自行水解者，應采用過濾法除菌。

試驗方法：從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種，于36℃±1℃培養(yǎng)，一般觀察2～3d。遲緩反應需觀察14～30d。

二、乳糖膽鹽發(fā)酵管

成分：

制法：

將蛋白胨，膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示劑，分裝每管10 mL，并放入一個小倒管，115℃高壓滅菌15min。

注：雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管除蒸餾水外，其他成分加倍。

三、5%乳糖發(fā)酵管

成分：

pH = 7.4

制法：

除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸餾水內，校正pH。將乳糖溶解于另外50mL蒸餾水內，分別滅菌121 ℃ 15min，將兩液混合，以無菌操作分裝于滅菌小試管內。

注：在此培養(yǎng)基內，大部分乳糖遲緩發(fā)酵的細菌可于ld內發(fā)酵。

四、緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR和VP試驗用)

成分：

制法：

溶化后校正pH，分裝試管，每管1mL，121℃高壓滅菌15min。

甲基紅(MR)試驗：

自瓊脂斜面挑取少量培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于36±1℃培養(yǎng)2～5d，哈夫尼亞菌則應在22～25℃培養(yǎng)。滴加甲基紅試劑一滴，立即觀察結果。鮮紅色為陽性，黃色為陰性，甲基紅試劑配法：10mg甲基紅溶于30mL95%乙醇中，然后加入20 mL蒸餾水。

V-P試驗：

用瓊脂培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于36±1℃培養(yǎng)2～4d。哈夫尼亞菌則應在22～25℃培養(yǎng)。加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氫氧化鉀溶液0.2mL充分振搖試管，觀察結果陽性反應立刻或于數(shù)分鐘內出現(xiàn)紅色，如為陰性，應放在36±1℃下培養(yǎng)4h再進行觀察。

五、營養(yǎng)明膠

成分：

pH = 6.8～7.0

制法：

加熱溶解，校正至pH7.4～7.6，分裝小管，121℃高壓滅菌10min，取出后迅速冷卻，使其凝固，復查終pH應為6.8～7.0。

試驗方法：用瓊脂培養(yǎng)物穿刺接種，放在22～25℃培養(yǎng)，每天觀察結果，記錄液化時間?；蚍旁?6士1℃培養(yǎng)，每天取出，放冰箱內30min后再觀察結果。

六、苯丙氨酸培養(yǎng)基

成分：

制法：

加熱溶解后分裝試管，121℃高壓滅菌15min，使成斜面。

試驗方法：

自瓊脂斜面上挑取大量培養(yǎng)物，移種于苯丙氨酸瓊脂，在36士1℃培養(yǎng)4h或18～24h，滴加10%三氯化鐵溶液2～3滴，自斜面培養(yǎng)物上 流下，苯丙氨酸脫氨酶陽性者呈深綠色。

七、蛋白胨水(靛基質試驗用)

成分：

pH = 7.4

制法：

按上述成分配制，分裝小試管，121℃高壓滅菌15min。

靛基質試劑

① 柯凡克試劑：將5g對二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中，然后緩慢加入濃鹽酸25ml。

② 歐-波試劑：將1g對二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇內，然后緩慢加入濃鹽酸20 ml。試驗方法：挑取小量培養(yǎng)物接種，在36士1℃培養(yǎng)1～2d，必要時可培養(yǎng)4～5d。加入柯凡克試劑約0.5mL，輕搖試管，陽性者于試劑層呈深紅色；或加入歐-波試劑約0.5 mL，沿管壁流下，覆蓋于培養(yǎng)液表面，陽性者于液面接觸處呈玫瑰紅色。

注：蛋白胨中應含有豐富的色氨酸。每批蛋白胨買來后，應先用已知菌種鑒定后方可使用。

八、硫酸亞鐵瓊脂(硫化氫試驗用)

成分：

制法：

加熱溶解，校正pH，分裝試管，115℃高壓滅菌15min，取出直立候其凝固。

試驗方法：

挑取瓊脂培養(yǎng)物，沿管壁穿刺，于36士1℃培養(yǎng)1～2d，觀察結果。產(chǎn)硫化氫者使培養(yǎng)基變?yōu)楹谏?/p>

注：腸桿菌科細菌測定硫化氫的產(chǎn)生，應采用三糖鐵瓊脂或本培養(yǎng)基。

九、尿素瓊脂

成分：

制法：

將除尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正pH，加入瓊脂，加熱溶化并分裝燒瓶。121℃高壓滅菌15min。冷至50～55℃，加入經(jīng)除菌過濾的尿素溶液，尿素的終濃度為2%，終pH應為7.2±0.1.分裝于滅菌試管內，放成斜面?zhèn)溆谩?/p>

試驗方法：

挑取瓊脂培養(yǎng)物接種，在36士1℃培養(yǎng)24h，觀察結果。尿素酶陽性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。

十、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基

成分：

pH = 7.6

制法：

將除氰化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶，121℃高壓滅菌15min。放在冰箱內使其充分冷卻。每100 mL培養(yǎng)基加入0.5%氰化鉀溶液2.0mL(濃度為1:10000)，分裝于12mm×100mm滅菌試管，每管約4mL，立刻用滅菌橡皮塞塞緊，放在4℃冰箱內，至少可保存兩個月。同時，將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基，分裝試管備用。

十一、營養(yǎng)瓊脂

成分：

制法：

將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內，加入15%氫氧化鈉溶液約2mL，校正pH至7.2～7.4。加入瓊脂，加熱煮沸，使瓊脂溶化分裝燒瓶，121℃高壓滅菌15min。

注：此培養(yǎng)基可供一般細菌培養(yǎng)之用，可傾注平板或制成斜面。如用于菌落計數(shù)，瓊脂量為1.5%；如作成平板或斜面，則應為2%。

十二、營養(yǎng)肉湯

成分：

pH = 7.4

制法：

按上述成分混合，溶解后校正pH，分裝燒瓶，每瓶225 mL ，121℃高壓滅菌15min。

十三、緩沖蛋白胨水(BP)

成分：

pH = 7.2

制法：

按上述成分配好后以大燒瓶裝，121℃高壓滅菌15min。臨用時無菌分裝每瓶225mL。

注：本培養(yǎng)基供沙門氏菌前增菌用。

十四、EC肉湯

成分：

制法：

將上述成分混合，溶解后，分裝有發(fā)酵倒管的試管中，121℃高壓滅菌15min。終pH為6.9±0.2。

十五、四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)

基礎培養(yǎng)基

基礎培養(yǎng)基

碘溶液

制法：

將基礎培養(yǎng)基的各成分加入蒸餾水中，加熱溶解，分裝每瓶100mL。分裝時應隨時振搖，使其中的碳酸鈣混勻，121℃高壓滅菌15min備用。臨用時每100mL基礎培養(yǎng)基中加入碘溶液2mL，0.1%煌綠溶液1mL。

十六、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)

成分：

1% L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液的配法：稱取L-胱氨酸0.1g或(DL-胱氨酸0.2g)，加1mol/L氫氧化鈉1.5mL，使溶解，再加入蒸餾水8.5mL即成。

制法：

將除亞硒酸氫鈉和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸餾水中，加熱煮沸，候冷備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中，加熱煮沸，候冷，以無菌操作與上液混合。再加入1% L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液1mL。

分裝于滅菌瓶中．每瓶100mL，pH應為7.0±0.1。

十七、亞硫酸鉍瓊脂(BS)

成分：

pH = 7.5

制法：

1、將前面5種成分溶解于300mL蒸餾水中。

2、將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50mL蒸餾水溶解。

3、將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解，冷至80℃。

4、將以上三液合并，補充蒸餾水至1000mL，校正pH，加0.5%煌綠水溶液5mL，搖勻，冷至50～55℃，傾注平皿。

注：此培養(yǎng)基不需高壓滅菌。制備過程不宜過分加熱，以免降低其選擇性。應在臨用前一天制備，貯存于室溫暗處，超過48h不宜使用。

十八、三糖鐵瓊脂(TSI)

成分：

pH = 7.4 

制法：

將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH，加入瓊脂，加熱煮沸，以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5 mL，搖勻，分裝試管。裝量宜多些，以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min，放置高層斜面?zhèn)溆谩?/p>

十九、三糖鐵瓊脂換用方法

成分：

pH = 7.4

制法：

將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH，加入瓊脂，加熱煮沸，以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5 mL，搖勻，分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min，放置高層斜面?zhèn)溆谩?/p>

二十、嗜鹽性試驗培養(yǎng)基

成分：

pH = 7.7

制法：

配制2%蛋白胨水，校正pH，共配制5瓶，每瓶100mL。每瓶分別加入不同量的氯化鈉：(1)不加；(2)3g；(3)7g；(4)9g；(5)11g。待溶解后分裝試管，121℃高壓滅菌15min。